首先我们了解一下装有原液的瓶子在哪里冻?
这叁种情况的优缺点:
在种情况,冻的过程省时,但是极速冷冻的时候瓶子会出现大量的冰晶,而不是大块的冰。大量的小冰晶的出现使得溶液中蛋白和冰接触的表面积剧增。同时溶液中大量细微的空气和蛋白混在一起,在融的过程中,影响蛋白的活性。
第二种情况,是很多客户现在正在使用的方法。直接放在℃的冰箱中。
如果放一个5L的瓶子,(Thermo冰箱的现在4层,每层高度也只能放5L)
在超低温里面10-12个小时,如果多放几个所需时间成倍的增加。
有数据 表明,冰箱内放置24个 5L的瓶子,每个瓶子放3.5L的液体。设定温度在-40℃,总共液体体积84L,所需时间100小时以上。后一个瓶子*冻住(离开冰点)需要80个小时左右。
这样长时间缓慢冷冻,单个瓶子蛋白浓度会发生极大的不均匀。有数据表明在17小时的冷度,瓶子内部的浓度变化就会在10倍左右。如果80倍的话。浓度变化值则差别更大。
同时,压缩机 长时间不停歇工作,超低温冰箱可能会出现故障(过热),
第叁种情况,速冻箱,具有和冰箱一样温度范围,降温速度快,同时机器带有风扇,空气可以充分循环,这种腔体很多带有加温设备,温度均一性很好。一般在-70℃下,空载+/-3℃以内,满载+/-2℃
由于速冻箱内部有大面积风扇,腔体能很好空气流通。
有数据 表明,冰箱内放置24个 5L的瓶子,每个瓶子放3.5L的液体。设定温度在-40℃,总共液体体积84L,所需时间10小时左右。
这个时间长短是大多数用户可以接受的。 大部分的科研认为10几个小时完成冷冻,单抗的活性影响不大。
现在说说瓶子冻融的优缺点。
每种不同体积大小的瓶子的时间差距明显,这样做工艺开发的时候只能使用同样体积大小的瓶子
体积越大,时间越长。
冻瓶子很多种情况,瓶子底部都会突出,也就是瓶子会变形。
瓶子的存储空间会很大。
瓶子中的液体会出现冷冻,开裂,再冷冻的反复冻融情况。
1个瓶子,5个瓶子,10个瓶子的冷冻曲线不一致。
在存取方面:
瓶子的优点,拜访方便。拿取方便,存储方便。但是占据关键大。
瓶子的分装和顿谤补颈苍不方便。整个无菌过程不符合骋惭笔要求。如果使用多孔的盖子和管路,&尘颈诲诲辞迟;&尘颈诲诲辞迟;&尘颈诲诲辞迟;&尘颈诲诲辞迟;分装和排空这个过程就能保证无菌了。但是在冷冻和存储又出现不安全隐患。
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